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梅毒螺旋體抗體樣品收集、處理及保存方法
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):使用純化并超聲裂解處理的梅毒螺旋體或其重組蛋白作為抗原,包被在固相板條上。這些抗原與待檢樣本中的抗梅毒螺旋體特異性抗體結(jié)合,通過酶促反應(yīng)底物顯色來檢測。
在科研環(huán)境中,梅毒螺旋體抗體血液樣品的收集、處理及保存方法通常涉及以下步驟:
1、血液樣本的收集處理:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
① 不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
② 抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。生化實驗一般建議用肝素抗凝。
選擇抗凝的注意點:
① 每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
② 收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③ 抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④ 抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
在處理這些樣本時,科研人員需要嚴格遵守實驗室的操作規(guī)程,以確保檢測的準確性和安全性。