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使用白介素ELISA試劑盒要注意這幾點(diǎn)
白介素Elisa試劑盒是一種用于測(cè)定白介素含量的試劑盒,它采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進(jìn)行檢測(cè)。白介素是一種由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的多功能細(xì)胞因子,可以調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞增殖等生理過(guò)程。因此,測(cè)定白介素含量對(duì)于研究免疫相關(guān)疾病、藥物研發(fā)以及臨床治療等方面有重要意義??梢杂糜跍y(cè)定多種不同類型的白介素,例如IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ等。試劑盒的優(yōu)點(diǎn)在于操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、特異性好、重復(fù)性好以及適用范圍廣等。
基于抗體和抗原的特異性相互作用原理。試劑盒通常包括以下組分:固相板、標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)抗體、酶標(biāo)記的二抗、洗滌緩沖液、顯色底物和停止液等。操作步驟包括先在固相板上涂覆抗體,然后加入待檢測(cè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品,待檢測(cè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品中的白介素將與抗體結(jié)合。接著加入酶標(biāo)記的二抗,以形成抗原-抗體-二抗夾心復(fù)合物,再加入顯色底物進(jìn)行反應(yīng),再加入停止液終止反應(yīng)并用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。
使用白介素ELISA試劑盒要注意以下幾點(diǎn):
1.樣本的處理:樣本應(yīng)該在冷藏條件下保存,同時(shí)避免過(guò)度凍融或脫水。
2.樣本的稀釋:嚴(yán)格按照說(shuō)明書上的要求進(jìn)行稀釋,原則上應(yīng)該保證樣本的濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。
3.洗滌操作:洗滌操作應(yīng)該進(jìn)行足夠次數(shù),以確保無(wú)非特異性結(jié)合物質(zhì)的存在。
4.檢測(cè)結(jié)果的判斷:將測(cè)得的OD值描在標(biāo)準(zhǔn)曲線上,以確定樣品的白介素濃度。同時(shí),要注意BaSO4、血紅蛋白等在樣品中的存在可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生干擾。