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13714396430
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- 品牌：瑞清
- 產(chǎn)地：深圳
- 型號(hào)：96T
- 貨號(hào)：RQ-SW19120
- 價(jià)格： ￥1750/盒
- 發(fā)布日期： 2023-05-26
- 更新日期： 2024-11-20
| 產(chǎn)地 | 深圳 |
| 保存條件 | 2-8℃ |
| 品牌 | 瑞清 |
| 貨號(hào) | RQ-SW19120 |
| 用途 | 用于科研實(shí)驗(yàn)使用 |
| 檢測(cè)方法 | 酶聯(lián)免疫法 |
| 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
| 適應(yīng)物種 | 人，小鼠，大鼠，植物，魚(yú)，蝦，蟹，牛，羊，狗，貓，微生物，細(xì)胞，土壤等動(dòng)植物 |
| 檢測(cè)限 | 詳詢 |
| 數(shù)量 | 100 |
| 包裝規(guī)格 | 96T |
| 標(biāo)記物 | HRP |
| 樣本 | 血清.血漿.組織.相關(guān)液體等 |
| 應(yīng)用 | 僅供科研使用 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
本試劑盒用于測(cè)定豬血清血漿及相關(guān)液體樣本中大腸桿菌病特異性抗體IgY（E.coli sIgY）表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬大腸桿菌病特異性抗體IgY（E.coli sIgY）表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中大腸桿菌病特異性抗體IgY（E.coli sIgY）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò) 洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中豬大腸桿菌病特異性抗體IgY（E.coli sIgY）的存在與否。
試劑盒組成
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1 |
30倍濃縮洗滌液 |
20ml×1瓶 |
7 |
終止液 |
6ml×1瓶 |
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2 |
酶標(biāo)試劑 |
6ml×1瓶 |
8 |
陽(yáng)性對(duì)照 |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶標(biāo)包被板 |
12孔×8條 |
9 |
陰性對(duì)照 |
0.5ml×1瓶 |
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4 |
樣品稀釋液 |
6ml×1瓶 |
10 |
說(shuō)明書(shū) |
1份 |
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5 |
顯色劑A液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
2張 |
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6 |
顯色劑B液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1個(gè) |
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2. 加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
1. 洗滌：操作同5。
2. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
3. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
4. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計(jì)算和結(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.20
臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為大腸桿菌病特異性抗體IgY（E.coli sIgY）陰性
陽(yáng)性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為大腸桿菌病特異性抗體IgY（E.coli sIgY）陽(yáng)性。
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物請(qǐng)避光保存。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須注意安全。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
