- 品牌:瑞清
- 產(chǎn)地:深圳
- 型號:0.2ml/200μg
- 貨號:RQ-XG20133
- 價格: ¥2/毫克
- 發(fā)布日期: 2023-02-19
- 更新日期: 2024-11-04
產(chǎn)地 | 深圳 |
品牌 | 瑞清 |
保存條件 | |
貨號 | RQ-XG20133 |
用途 | 科研實驗 |
應(yīng)用范圍 | 詳見說明書 |
抗原來源 | Rabbit |
保質(zhì)期 | |
抗體名 | |
是否單克隆 | |
克隆性 | |
靶點 | |
適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
形態(tài) | |
宿主 | |
標(biāo)記物 | |
包裝規(guī)格 | 0.2ml/200μg |
亞型 | |
標(biāo)識物 | |
濃度 | % |
免疫原 | KLH conjugated synthetic peptide derived from human PLEKHM1 |
是否進口 | 否 |
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采血,家兔、山羊、綿羊可采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
注意事項:
1.請根據(jù)實驗需要選擇工作效價,部分實驗根據(jù)具體實驗情況可在推薦工作效價基礎(chǔ)上進行增加或減小。
2.短期保存的抗體:如抗體幾周內(nèi)就會使用,收到后推薦在2-8℃保存,2-8℃短暫保存數(shù)周對抗體活性沒有影響。
3.長期保存的抗體:如抗體需超過1個月后才會使用,請酌情分裝后于-20℃保存。
4.建議:將抗體保存在冰箱里層,避免溫度變化造成反復(fù)凍融。避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。