- 品牌:瑞清
- 產(chǎn)地:深圳
- 貨號(hào):RQ-TZ2273
- 發(fā)布日期: 2023-02-18
- 更新日期: 2024-11-04
產(chǎn)地 | 深圳 |
品牌 | 瑞清 |
貨號(hào) | RQ-TZ2273 |
用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
包裝規(guī)格 | 50T |
是否進(jìn)口 | 否 |
PCR試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
1.隨時(shí)可用。
2.優(yōu)化的緩沖液可增強(qiáng)特異性并減少引物二聚體的形成。
3.高靈敏度,特異性和可靠性。
4.為不同的qPCR儀器提供了被動(dòng)參考染料
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以?xún)?nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)。陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集。
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次)。
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
公司其他產(chǎn)品:
凋亡抑制蛋白Survivin基因PCR檢測(cè)試劑盒
動(dòng)物源性成分(18S)PCR檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦桿狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒
多瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒
鵝特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒
鵝細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒
惡性瘧PCR檢測(cè)試劑盒
非洲馬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒
肺耐藥蛋白基因PCR檢測(cè)試劑盒
麩質(zhì)Gluten基因PCR檢測(cè)試劑盒
副雞嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒