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ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué) 調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗ti,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴大,

免責(zé)聲明

試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。

嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。

產(chǎn)品特點

一、高效、靈敏、特異的抗ti;

二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液 等等多種標(biāo)本類型;

五、節(jié)省實驗經(jīng)費。

elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。

組成結(jié)構(gòu)

1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)du素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞 迅速小心地分離。

2、血漿:EDTA、檸檬suan鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑盒成分

1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

2 酶標(biāo)記抗ti: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2

4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biāo)記抗ti稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

7 終止液: 1N硫suan 12mL x 1

8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗ti和顯色劑)

標(biāo)本要求 :

1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍) 后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

1. 夾心法:

夾心法常用于檢測大分子抗原,一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗ti固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗ti

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結(jié)

c. 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗ti,與待測抗原進行鍵結(jié)

d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗ti,加入帶有酶的二次抗ti,與一次抗ti鍵結(jié)

e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果

原理:針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗ti分別作為固相抗ti和酶標(biāo)抗ti,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。

2. 間接法

間接法常用于檢測抗ti,一般的操作步驟為:

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗ti,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結(jié)。

c. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗ti,與待測的一次抗ti鍵結(jié)。

d. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗ti的含量。

原理:利用酶標(biāo)記的抗抗ti以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗ti。

3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗ti固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗ti

b. 加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結(jié)

c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的抗ti數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗ti就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗ti鍵結(jié),即所謂競爭法之由來。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。

e. 當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗ti的抗原,或是不易得到足夠的純化抗ti以固著于孔盤上時,一般會考慮使用競爭法ELISA。

[說 明]

1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量 技術(shù)風(fēng)險。

2.最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及 當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。

4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到 的檢測結(jié)果。

5.本公司只對試劑盒本身負責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。

6.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。

7.若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。

8.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗ti及捕獲抗ti不匹配,而不被檢測出。

公司其他產(chǎn)品:

小鼠受磷蛋白(PLN)elisa試劑盒

小鼠肌質(zhì)網(wǎng)鈣泵2α亞型(SERCA2α)elisa試劑盒

小鼠和精胺(Spm)elisa試劑盒

小鼠CpG寡脫氧核苷酸(CpG-ODN)elisa試劑盒

小鼠乳清蛋白特異性IgE(La-sIgE)elisa試劑盒

小鼠抗大豆蛋白抗體(Anti-soy protein-Ab)elisa試劑盒

小鼠骨織素(OSTN)elisa試劑盒

小鼠鈉;鉀離子轉(zhuǎn)運ATP酶β1肽(ATP1β1)elisa試劑盒

小鼠Ⅴ型利鈉鈦(Ⅴ Nesiritide)elisa試劑盒

小鼠長鏈脂肪酸(LCTs)elisa試劑盒

小鼠Dystonin蛋白(DST)elisa試劑盒

小鼠含干擾素誘導(dǎo)解旋酶C域蛋白1(IFIH1)elisa試劑盒

小鼠精脒精胺乙酰轉(zhuǎn)移酶(SSAT)elisa試劑盒